Prueba de campo para diagnóstico de infección por virus Chikungunya
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 27 Oct 2016 |
Imagen: Un laboratorio de maleta utilizado para el diagnóstico del virus Chikungunya (CHIKV) en el campo (Fotografía cortesía de Ahmed Abd El Wahed).
La infección causada por el virus de Chikungunya (CHIKV), produce síntomas que son similares a los del dengue y el Zika, así como de otras enfermedades virales, incluyendo la gripe; el diagnóstico exacto del CHIKV es importante para poder responder eficazmente a los brotes, incluyendo el manejo del paciente y el control de los mosquitos.
Se ha desarrollado un análisis de amplificación, de polimerasa, recombinasa, de transcriptasa inversa (RT) (RPA), para la detección rápida del CHIKV en muestras clínicas. La detección basada en RPA, de pequeñas cantidades de ADN, es una alternativa a la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y se basa en reacciones que se pueden realizar a temperaturas constantes.
Un equipo internacional de científicos dirigido por aquellos en el Instituto Robert-Koch (Berlín, Alemania) incluyó en su estudio a 78 pacientes con antecedentes de aparición súbita de fiebre, dolor de cabeza, fatiga, náuseas, vómitos, erupción cutánea, mialgia y poliartralgia severa y muy dolorosa, sugestiva de infección por el CHIKV. Un grupo de Tailandia proporcionó cincuenta y ocho muestras de plasma y 20 CHIKV muestras de suero positivas en que fueron obtenidas de pacientes, con sospecha de estar infectados por CHIKV durante el examen médico de rutina, fueron proporcionadas por científicos franceses.
El equipo diseñó un conjunto de reactivos-CHIKV específicos y demostró que el ensayo fue capaz de detectar cantidades muy pequeñas de ácido ribonucleico del CHIKV (ARN). El ensayo de RT-RPA fue ligeramente menos sensible que la RT-PCR, pero ambos ensayos produjeron resultados idénticos en muestras clínicas de 20 pacientes con infección conocida por CHIKV y 58 muestras de casos sospechosos.
A través del ensayo de la prueba RT-EPR en diferentes cepas de CHIKV y un panel de alfa - y arbovirus, relacionados, los científicos encontraron que el ensayo detecta con seguridad las 18 cepas diferentes de CHIKV ensayadas. Además, no hubo reactividad cruzada del ensayo con cualquiera de los otros virus probados, excepto para el virus muy estrechamente relacionado, O'nyong'nyong (ONNV). Usando un conjunto modificado de reactivos de ensayo, los científicos fueron capaces de eliminar el problema de resultados falsos positivos causados por el ONNV. La sensibilidad y especificidad diagnóstica del ensayo CHIKV RT-RPA fueron determinadas como 100%.
Los investigadores resaltan que los reactivos de RPA son estables a temperatura ambiente (25-38°C), lo que significa que no necesitan ser refrigerados. Los autores concluyeron que el ensayo CHIKV RPA es una herramienta prometedora para el diagnóstico del CHIKV, en los puntos de atención. La integración en un ensayo multímero o multiplex para la detección simultánea del CHIKV, del virus del Dengue y del virus de Zika, así como un control interno mejoraría las investigaciones de brotes, ya que los tres virus inducen el mismo cuadro clínico tras la infección y co-circulan, cada vez más, en muchas partes del mundo. El estudio fue publicado el 29 de septiembre de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.
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