Análisis múltiplex detectan el VHS-1/2 y Varicella Zoster
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 03 Feb 2015 |
Imagen: Microfotografía electrónica de transmisión (TEM) del virus Varicella zoster (Fotografía cortesía del Dr. Erskine Palmer).
Se comparó el desempeño de dos reacciones en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR), múltiplex, con las PCR en tiempo real, individuales, para la detección del virus del herpes simplex-1 (VHS-1), VHS-2 y del virus Varicella zoster (VVZ), a partir de muestras clínicas.
El cultivo viral ha sido considerado la prueba estándar de oro, aunque los métodos moleculares han demostrado ser más rápidos y sensibles y en la actualidad, la mayoría de los laboratorios realizan PCR en tiempo real, para la detección del VHS y VVZ.
Los científicos de la Clínica Mayo (Rochester, MN, EUA) analizaron 26.186 muestras que habían sido enviadas a su laboratorio para análisis de rutina mediante los reactivos analito-específicos (ASR), de PCR, en tiempo real, VHS-1/2-PCR en tiempo real y/o una prueba desarrollada por el laboratorio (LDT) para el VVZ, entre noviembre de 2013 y marzo de 2014. Las pruebas realizadas por los métodos de rutina incluyeron la extracción de ácidos nucleicos mediante el MagNA Pure (Roche; Basilea, Suiza y el análisis en el Roche LightCycler 2.0.
Los dos ensayos multiplex que fueron comparados con la PCR de rutina, fueron el análisis, aprobado por la Dirección de Alimentos y Medicamentos de los EE.UU, (FDA, Silver Springs, MD, EUA), Lyra VHS 1+2/VVZ (Quidel, San Diego, CA, EUA) y los reactivos analito-específicos, combinados, Simplexa VHS-1/2 y VZV (Focus Diagnostics, Cypress, CA, EUA). Las muestras también fueron analizadas mediante la combinación de los ASRs de Focus Diagnostics para VHS 1+2 y VVZ y la prueba fue realizada en el Ciclador Integrado Focus 3M.
Los resultados fueron comparados con un estándar de consenso, definido como el resultado obtenido por al menos dos de los tres métodos moleculares. La sensibilidad del ensayo Quidel varió desde 92,0%, para VHS-1 a 97,7% para el VHS-2, mientras que la especificidad para todos los objetivos fue del 100%. El ensayo Focus demostró 100% de sensibilidad para todos los objetivos, y la especificidad por ciento osciló entre 96,8% para el VHS-1 hasta 100% para el VHS-2 y VVZ.
Los autores concluyeron que para la detección de VHS-2, en el líquido cefalorraquídeo (LCR), el ensayo Focus mostró 100% de sensibilidad y especificidad, mientras que el método Quidel VHS-2 exhibió una sensibilidad del 87,5% (7/8) y una especificidad del 100 % (18/18). Se necesitan más estudios que evalúen un número mayor de muestras de LCR para definir mejor el desempeño de estas pruebas. Los ensayos multiplex para los VHS-1/2 y VVZ ofrecen una opción prometedora para aquellos laboratorios clínicos que buscan reducir los tiempos de trabajo manual y de respuesta. El estudio fue publicado en línea en la edición de enero de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.
Enlaces relacionados:
Mayo Clinic
Roche
US Food and Drug Administration
Quidel
Focus Diagnostics
El cultivo viral ha sido considerado la prueba estándar de oro, aunque los métodos moleculares han demostrado ser más rápidos y sensibles y en la actualidad, la mayoría de los laboratorios realizan PCR en tiempo real, para la detección del VHS y VVZ.
Los científicos de la Clínica Mayo (Rochester, MN, EUA) analizaron 26.186 muestras que habían sido enviadas a su laboratorio para análisis de rutina mediante los reactivos analito-específicos (ASR), de PCR, en tiempo real, VHS-1/2-PCR en tiempo real y/o una prueba desarrollada por el laboratorio (LDT) para el VVZ, entre noviembre de 2013 y marzo de 2014. Las pruebas realizadas por los métodos de rutina incluyeron la extracción de ácidos nucleicos mediante el MagNA Pure (Roche; Basilea, Suiza y el análisis en el Roche LightCycler 2.0.
Los dos ensayos multiplex que fueron comparados con la PCR de rutina, fueron el análisis, aprobado por la Dirección de Alimentos y Medicamentos de los EE.UU, (FDA, Silver Springs, MD, EUA), Lyra VHS 1+2/VVZ (Quidel, San Diego, CA, EUA) y los reactivos analito-específicos, combinados, Simplexa VHS-1/2 y VZV (Focus Diagnostics, Cypress, CA, EUA). Las muestras también fueron analizadas mediante la combinación de los ASRs de Focus Diagnostics para VHS 1+2 y VVZ y la prueba fue realizada en el Ciclador Integrado Focus 3M.
Los resultados fueron comparados con un estándar de consenso, definido como el resultado obtenido por al menos dos de los tres métodos moleculares. La sensibilidad del ensayo Quidel varió desde 92,0%, para VHS-1 a 97,7% para el VHS-2, mientras que la especificidad para todos los objetivos fue del 100%. El ensayo Focus demostró 100% de sensibilidad para todos los objetivos, y la especificidad por ciento osciló entre 96,8% para el VHS-1 hasta 100% para el VHS-2 y VVZ.
Los autores concluyeron que para la detección de VHS-2, en el líquido cefalorraquídeo (LCR), el ensayo Focus mostró 100% de sensibilidad y especificidad, mientras que el método Quidel VHS-2 exhibió una sensibilidad del 87,5% (7/8) y una especificidad del 100 % (18/18). Se necesitan más estudios que evalúen un número mayor de muestras de LCR para definir mejor el desempeño de estas pruebas. Los ensayos multiplex para los VHS-1/2 y VVZ ofrecen una opción prometedora para aquellos laboratorios clínicos que buscan reducir los tiempos de trabajo manual y de respuesta. El estudio fue publicado en línea en la edición de enero de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.
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