Se desarrolla un análisis RPA de flujo lateral para el Cryptococcus en el LCR
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 12 Mar 2019 |
Imagen: Tiras reactivas del kit de análisis de flujo lateral de antígeno criptocócico IMMY (LFA) (Fotografía cortesía del Instituto de Investigación Médica, Kuala Lumpur, Malasia).
Las presentaciones más comunes de la criptococosis son la meningitis y la meningoencefalitis. La meningitis criptocócica (MC) es una meningoencefalitis subaguda y la causa más común de meningitis en adultos con tasas de mortalidad muy altas, así como pérdida de visión y de audición en los sobrevivientes.
El diagnóstico precoz y el tratamiento de la criptococosis reducen la mortalidad. Se debe realizar una punción lumbar, también conocida como punción espinal y el análisis del líquido cefalorraquídeo (LCR) en los pacientes con sospecha de MC. Los métodos tradicionales para detectar Cryptococcus spp. tales como la coloración de tinta china y el cultivo no son ideales. Aunque es lo suficientemente sensible y específico, la detección del polisacárido del antígeno criptocócico tiene un efecto de gancho de dosis alta.
Los científicos del Hospital de la Universidad de Medicina del Sur de Shenzhen (Shenzhen, China) y sus colegas, desarrollaron y construyeron tiras de flujo lateral combinadas con el ensayo de amplificación de polimerasa de recombinasa (LF-RPA) para detectar las secuencias de ADN específicas de C. neoformans y C. gattii. El límite de detección se evaluó utilizando diluciones en serie del ADN genómico de C. neoformans y de C. gattii. La especificidad fue evaluada por una cantidad excesiva del ADN genómico de otros patógenos. También se analizaron el tiempo óptimo de detección y la temperatura de amplificación. Los parámetros de diagnóstico se calcularon primero utilizando 114 muestras clínicas y luego se compararon con los de otros métodos de diagnóstico.
Los resultados del ensayo LF-RPA y el “ensayo de flujo lateral de CrAg” se compararon con los del cultivo y/o la coloración con tinta china. La coloración con tinta china y el “ensayo de flujo lateral de CrAg” se realizaron con el “kit de coloración de Cryptococcus neoformans” (Baso Diagnostics, Inc., Zhuhai, China) y el “kit de Análisis de Flujo Lateral para el Antígeno Criptocócico” (IMMY, Inc., Norman, OK, EUA), respectivamente.
El equipo informó que el ensayo LF-RPA pudo detectar 0,64 pg de ADN genómico de C. neoformans por reacción al cabo de 10 minutos y fue altamente específico para Cryptococcus spp. El sistema podría funcionar bien en un amplio rango de temperatura de 25 a 45°C. La sensibilidad y especificidad general fueron del 95,2% y del 95,8%, respectivamente. Como plantilla de amplificación para el ensayo de LF-RPA, tanto los lisados celulares como el ADN genómico producen resultados experimentales similares. El límite de detección del ensayo LF-RPA es ligeramente más alto que el del “Ensayo de Flujo Lateral de CrAg”.
Los autores concluyeron que su sistema LF-RPA demostró ser un método sensible y específico para la detección visible, rápida y precisa de Cryptococcus spp. en el líquido cefalorraquídeo y podría ser útil para el cribado preliminar clínico de la meningitis criptocócica. El estudio se publicó el 25 de enero de 2019 en la revista BMC Infectious Diseases.
Enlace relacionado:
Universidad de Medicina del Sur de Shenzhen
Baso Diagnostics, Inc
IMMY, Inc
El diagnóstico precoz y el tratamiento de la criptococosis reducen la mortalidad. Se debe realizar una punción lumbar, también conocida como punción espinal y el análisis del líquido cefalorraquídeo (LCR) en los pacientes con sospecha de MC. Los métodos tradicionales para detectar Cryptococcus spp. tales como la coloración de tinta china y el cultivo no son ideales. Aunque es lo suficientemente sensible y específico, la detección del polisacárido del antígeno criptocócico tiene un efecto de gancho de dosis alta.
Los científicos del Hospital de la Universidad de Medicina del Sur de Shenzhen (Shenzhen, China) y sus colegas, desarrollaron y construyeron tiras de flujo lateral combinadas con el ensayo de amplificación de polimerasa de recombinasa (LF-RPA) para detectar las secuencias de ADN específicas de C. neoformans y C. gattii. El límite de detección se evaluó utilizando diluciones en serie del ADN genómico de C. neoformans y de C. gattii. La especificidad fue evaluada por una cantidad excesiva del ADN genómico de otros patógenos. También se analizaron el tiempo óptimo de detección y la temperatura de amplificación. Los parámetros de diagnóstico se calcularon primero utilizando 114 muestras clínicas y luego se compararon con los de otros métodos de diagnóstico.
Los resultados del ensayo LF-RPA y el “ensayo de flujo lateral de CrAg” se compararon con los del cultivo y/o la coloración con tinta china. La coloración con tinta china y el “ensayo de flujo lateral de CrAg” se realizaron con el “kit de coloración de Cryptococcus neoformans” (Baso Diagnostics, Inc., Zhuhai, China) y el “kit de Análisis de Flujo Lateral para el Antígeno Criptocócico” (IMMY, Inc., Norman, OK, EUA), respectivamente.
El equipo informó que el ensayo LF-RPA pudo detectar 0,64 pg de ADN genómico de C. neoformans por reacción al cabo de 10 minutos y fue altamente específico para Cryptococcus spp. El sistema podría funcionar bien en un amplio rango de temperatura de 25 a 45°C. La sensibilidad y especificidad general fueron del 95,2% y del 95,8%, respectivamente. Como plantilla de amplificación para el ensayo de LF-RPA, tanto los lisados celulares como el ADN genómico producen resultados experimentales similares. El límite de detección del ensayo LF-RPA es ligeramente más alto que el del “Ensayo de Flujo Lateral de CrAg”.
Los autores concluyeron que su sistema LF-RPA demostró ser un método sensible y específico para la detección visible, rápida y precisa de Cryptococcus spp. en el líquido cefalorraquídeo y podría ser útil para el cribado preliminar clínico de la meningitis criptocócica. El estudio se publicó el 25 de enero de 2019 en la revista BMC Infectious Diseases.
Enlace relacionado:
Universidad de Medicina del Sur de Shenzhen
Baso Diagnostics, Inc
IMMY, Inc
Últimas Microbiología noticias
- Análisis de sangre predice sepsis e insuficiencia orgánica en niños
- Análisis de sangre para tuberculosis podría detectar millones de propagadores silenciosos
- Un análisis de sangre simple combinado con un modelo de riesgo personalizado mejora el diagnóstico de sepsis
- Nuevo análisis de sangre reduce tiempo de diagnóstico de infecciones por micobacterias no tuberculosas de meses a horas
- Nuevo análisis para tuberculosis podría ampliar acceso a pruebas en países de ingresos bajos y medios
- Prueba rápida diagnostica enfermedades tropicales en horas para tratamiento con antibióticos más rápido
- Pruebas moleculares rápidas permiten tratamiento antibiótico más rápido y específico para neumonía
- Plataforma rápida de PSA proporciona resultados terapéuticos específicos días antes que el estándar de atención actual
- Nuevo método de análisis detecta patógenos en sangre de forma más rápida y precisa al fundir ADN
- Prueba rápida de sepsis ofrece resultados dos días más rápidos
- Diagnóstico rápido portátil por PCR podría detectar gonorrea y susceptibilidad a antibióticos
- Prueba CRISPR diagnostica mpox más rápido que método de PCR de laboratorio
- Prueba de PCR multiplexada para detección de patógenos y resistencia a antibióticos ayuda a brindar un tratamiento rápido de ITU
- Nuevo algoritmo detecta e identifica nuevos organismos bacterianos
- Analizador de mesa promete detección de ITU en 1 hora e indicación de sensibilidad a antibióticos
- Prueba rápida junto a la cama podría proteger a recién nacidos de enfermedades potencialmente mortales