Prueba rápida evalúa biomarcador del paludismo en plasma
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 27 Oct 2015 |

Imagen A: El gel y el generador de imágenes del blot, el Gel Doc TM XR+ (Fotografía cortesía de Bio-Rad).

Imagen B: La prueba rápida Paracheck para el diagnóstico del paludismo por Plasmodium falciparum (Fotografía cortesía de Orchid Biomedical Systems).
Un extendido de la sangre con paludismo o una prueba rápida para diagnóstico (PDR) son a menudo la única opción disponible para el diagnóstico, pero la presencia de parásitos es inespecífica y con frecuencia se diagnostica por error el paludismo, lo cual da como resultado que no se tienen en cuenta y no se tratan otras enfermedades que amenazan la vida.
La presencia en el plasma de la proteína 2 rica en histidina (PfHRP2) del Plasmodium falciparum es el biomarcador más exacto para el paludismo grave, pero su medición mediante los análisis ELISA ha sido considerado demasiado difícil de manejar como para incorporarla al manejo clínico.
Unos científicos de la Universidad de Mahidol (Bangkok, Tailandia) y sus colegas británicos caracterizaron las condiciones en las cuales podrían aplicarse las PDR, lo cual se llevó a cabo en dos fases, con muestras de plasma de unos niños registrados en el sitio de Teule (Tanzania) donde se realiza el estudio AQUAMAT de casos severos de paludismo, en el cual secomparan la quinina y el artesunato. A esas muestras de plasma, con las cuales se cubre un amplio rango de concentraciones de PfHRP2, se les realizaron unas pruebas rápidas para diagnóstico(PDR). Tales PDR fueron leídas a simple vista y por captura digital y las concentraciones de PfHRP2 se midieron mediante una dilución en serie. Luego se compararon los resultados con las lecturas de un ELISA.
La intensidad de las bandas se evaluó mediante el escaneo digital y la evaluación visual. El escaneo se realizó utilizando un Gel Doc TM XR+ de BioRad (BioRad; Hércules, CA, EUA, www.bio-rad.com), utilizando la aplicación colorimétrica optimizada para bandas tenues y se capturó la intensidad máxima de cada área seleccionada. Se estudiaron cuatro kits de PDR basadas exclusivamente en la detección de la PfHRP2.
La marca Paracheck (Orchid Biomedical Systems; Goa, India) mostró la mejor correlación, así como la más baja variabilidad entre observadores para la medición de la PfHRP2. En el plasma mediante dilución en serie, mostró un sesgo mínimo en la comparación con el ELISA y tuvo límites de concordancia aceptables. Se examinaron tres diluciones diferentes de un conjunto bien caracterizado de muestras de admisión, de pacientes con paludismo, tanto sin complicaciones como graves, en un entorno de baja transmisión y se obtuvo un área bajo la curva de eficacia diagnóstica de 0,844 en cuanto a la identificación del paludismo grave.
Los autores concluyeron que se puede evaluar la PfHRP2 en el plasma a través de esa sola PDR, con la aplicación de una dilución del plasma de 1: 5 o de 1:10 para obtener información útil para el diagnóstico que permita ayudar en el manejo del paciente o para su inclusión en estudios clínicos y que se puede utilizar esa sola PDR para obtener información útil sobre la concentración de PfHRP2 en el plasma y por lo tanto sobre la causa subyacente de una enfermedad febril grave. El estudio fue publicado el 22 de septiembre de 2015, en la revista Malaria Journal.
Enlaces relacionados:
Mahidol University
Orchid Biomedical Systems
La presencia en el plasma de la proteína 2 rica en histidina (PfHRP2) del Plasmodium falciparum es el biomarcador más exacto para el paludismo grave, pero su medición mediante los análisis ELISA ha sido considerado demasiado difícil de manejar como para incorporarla al manejo clínico.
Unos científicos de la Universidad de Mahidol (Bangkok, Tailandia) y sus colegas británicos caracterizaron las condiciones en las cuales podrían aplicarse las PDR, lo cual se llevó a cabo en dos fases, con muestras de plasma de unos niños registrados en el sitio de Teule (Tanzania) donde se realiza el estudio AQUAMAT de casos severos de paludismo, en el cual secomparan la quinina y el artesunato. A esas muestras de plasma, con las cuales se cubre un amplio rango de concentraciones de PfHRP2, se les realizaron unas pruebas rápidas para diagnóstico(PDR). Tales PDR fueron leídas a simple vista y por captura digital y las concentraciones de PfHRP2 se midieron mediante una dilución en serie. Luego se compararon los resultados con las lecturas de un ELISA.
La intensidad de las bandas se evaluó mediante el escaneo digital y la evaluación visual. El escaneo se realizó utilizando un Gel Doc TM XR+ de BioRad (BioRad; Hércules, CA, EUA, www.bio-rad.com), utilizando la aplicación colorimétrica optimizada para bandas tenues y se capturó la intensidad máxima de cada área seleccionada. Se estudiaron cuatro kits de PDR basadas exclusivamente en la detección de la PfHRP2.
La marca Paracheck (Orchid Biomedical Systems; Goa, India) mostró la mejor correlación, así como la más baja variabilidad entre observadores para la medición de la PfHRP2. En el plasma mediante dilución en serie, mostró un sesgo mínimo en la comparación con el ELISA y tuvo límites de concordancia aceptables. Se examinaron tres diluciones diferentes de un conjunto bien caracterizado de muestras de admisión, de pacientes con paludismo, tanto sin complicaciones como graves, en un entorno de baja transmisión y se obtuvo un área bajo la curva de eficacia diagnóstica de 0,844 en cuanto a la identificación del paludismo grave.
Los autores concluyeron que se puede evaluar la PfHRP2 en el plasma a través de esa sola PDR, con la aplicación de una dilución del plasma de 1: 5 o de 1:10 para obtener información útil para el diagnóstico que permita ayudar en el manejo del paciente o para su inclusión en estudios clínicos y que se puede utilizar esa sola PDR para obtener información útil sobre la concentración de PfHRP2 en el plasma y por lo tanto sobre la causa subyacente de una enfermedad febril grave. El estudio fue publicado el 22 de septiembre de 2015, en la revista Malaria Journal.
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