Análisis de sangre predice riesgo de artritis reumatoide
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 07 Jan 2016 |
Imagen: El espectrómetro J-815 CD puede hacer mediciones en un rango de longitudes de onda de 163 nm a 900 nm (Fotografía cortesía de Jasco).
Cuando la inflamación se produce en el cuerpo, algunas proteínas se alteran en un proceso llamado citrulinización y estas formas alteradas pueden provocar una respuesta inmune del cuerpo, en la que los anticuerpos atacan el cuerpo causando enfermedades autoinmunes como la artritis reumatoide (AR).
Por esa razón, las pruebas que detectan a los anticuerpos contra las proteínas citrulinadas ya se utilizan para diagnosticar la enfermedad y mientras que las pruebas de proteínas individuales suelen tener una sensibilidad diagnóstica relativamente baja, una prueba más general llamada péptido cíclico citrulinado (PCCh) que detecta péptidos citrulinados sintéticos, identifica muchos más casos de AR.
Los científicos del Instituto Kennedy de Reumatología (Oxford, Reino Unido) examinaron una cohorte compuesta por 20 pacientes británicos con AR y 20 individuos sanos. Los 101 casos de pre-AR y 326 controles correspondientes fueron identificados en un estudio de casos y controles anidado, en cuatro cohortes del sur de Europa. Mil novecientos ochenta y cinco casos de AR y 160 controles provenían de la población sueca de casos y controles poblacionales. Doscientos ochenta y siete pacientes con AR y 330 pacientes de control con osteoartritis (OA) provenían de los EUA
Los péptidos fueron analizados en un sistema de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), comprendiendo un sistema Dionex Ultimate nLC 3000 acoplado a un espectrómetro de masas, Q-Exactive (Thermo Scientific; Waltham, MA, EUA). La Fluorimetría de Barrido Diferencial fue registrada en el sistema de reacción en cadena de polimerasa, en tiempo real, ViiA7 (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) y el dicroísmo circular fue realizado y registrado en un espectrofotómetro J-815 CD (Jasco, Easton, MD, EUA). Los anticuerpos contra los péptidos cíclicos que contenían sitios citrulinados fueron estudiados en los sueros de pacientes con AR mediante un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA).
Se identificaron dos péptidos citrulinados inmunodominantes: tenascina-C 1 (cTNC1, VFLRRKNG-cit-ENFYQNW) y cTNC5 (EHSIQFAEMKL-cit-PSNF-cit-NLEG-cit-cit-KR). Los anticuerpos contra los dos péptidos mostraron reactividad cruzada limitada con los epítopes proteínicos del anticuerpo anticitrulinado (ACPA) de la α-enolasa, la vimentina y el fibrinógeno, y ninguna reactividad contra los péptidos citrulinados del fibrinógeno que comparten homología de secuencia con el globo de tipo fibrinógeno (FBG). Se detectaron anticuerpos cTNC5, en el 18% de los sueros pre-RA, y en el 47% de los 1.985 pacientes suecos con AR y 51% de los 287 pacientes con AR de América del Norte. La especificidad fue del 98% en comparación con 160 controles sanos y 330 pacientes con osteoartritis.
Enlaces relacionados:
Kennedy Institute of Rheumatology
Thermo Scientific
Applied BioSystems
Jasco
Por esa razón, las pruebas que detectan a los anticuerpos contra las proteínas citrulinadas ya se utilizan para diagnosticar la enfermedad y mientras que las pruebas de proteínas individuales suelen tener una sensibilidad diagnóstica relativamente baja, una prueba más general llamada péptido cíclico citrulinado (PCCh) que detecta péptidos citrulinados sintéticos, identifica muchos más casos de AR.
Los científicos del Instituto Kennedy de Reumatología (Oxford, Reino Unido) examinaron una cohorte compuesta por 20 pacientes británicos con AR y 20 individuos sanos. Los 101 casos de pre-AR y 326 controles correspondientes fueron identificados en un estudio de casos y controles anidado, en cuatro cohortes del sur de Europa. Mil novecientos ochenta y cinco casos de AR y 160 controles provenían de la población sueca de casos y controles poblacionales. Doscientos ochenta y siete pacientes con AR y 330 pacientes de control con osteoartritis (OA) provenían de los EUA
Los péptidos fueron analizados en un sistema de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), comprendiendo un sistema Dionex Ultimate nLC 3000 acoplado a un espectrómetro de masas, Q-Exactive (Thermo Scientific; Waltham, MA, EUA). La Fluorimetría de Barrido Diferencial fue registrada en el sistema de reacción en cadena de polimerasa, en tiempo real, ViiA7 (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) y el dicroísmo circular fue realizado y registrado en un espectrofotómetro J-815 CD (Jasco, Easton, MD, EUA). Los anticuerpos contra los péptidos cíclicos que contenían sitios citrulinados fueron estudiados en los sueros de pacientes con AR mediante un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA).
Se identificaron dos péptidos citrulinados inmunodominantes: tenascina-C 1 (cTNC1, VFLRRKNG-cit-ENFYQNW) y cTNC5 (EHSIQFAEMKL-cit-PSNF-cit-NLEG-cit-cit-KR). Los anticuerpos contra los dos péptidos mostraron reactividad cruzada limitada con los epítopes proteínicos del anticuerpo anticitrulinado (ACPA) de la α-enolasa, la vimentina y el fibrinógeno, y ninguna reactividad contra los péptidos citrulinados del fibrinógeno que comparten homología de secuencia con el globo de tipo fibrinógeno (FBG). Se detectaron anticuerpos cTNC5, en el 18% de los sueros pre-RA, y en el 47% de los 1.985 pacientes suecos con AR y 51% de los 287 pacientes con AR de América del Norte. La especificidad fue del 98% en comparación con 160 controles sanos y 330 pacientes con osteoartritis.
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