Novedosa herramienta molecular detecta a personas asintomáticas infectadas por malaria
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 09 Nov 2015 |

Imagen A: Una visualización de una reacción de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) en un formato de placa de 96 pozos que muestra diferencias de color entre las muestras positivas y negativas (Foto cortesía de la Unidad de Consejo de Investigación Médica, Gambia).

Imagen B: La prueba de diagnóstico rápida SD Bioline Malaria Antígeno Pf (RDT) para Plasmodium falciparum (Foto cortesía de Standard Diagnostics).
Los programas de control de Malaria que buscan disminuir la transmisión local y alcanzar la condición de pre-eliminación, requieren la detección apropiada de los parásitos de Plasmodium en la sangre periférica, tanto en pacientes febriles como en portadores asintomáticos.
Los portadores asintomáticos, que representan el depósito humano que contribuye a la transmisión de los parásitos, generalmente tienen densidades de parásitos mucho menores, en comparación con los individuos sintomáticos, en los umbrales de detección de menos de 200 parásitos/μL, por debajo del cual las herramientas de diagnóstico estándar, tales como la microscopía y pruebas de diagnóstico rápido (PDR) se vuelven menos fiables.
Un equipo de colaborares científicos dirigido por los que están en la Unidad del Concejo de Investigación Médica (Banjul, Gambia) recolectaron la sangre de 341 individuos cuya edad media era de 9 años (rango de 1 a 68 años), y se hicieron exámenes para detectar la malaria. Con un solo pinchazo en el dedo, se recogieron muestras de sangre para la PDR, la gota gruesa (TBF) y muestras de sangre seca (DBS). Las PDR fueron leídas inmediatamente en el campo, mientras que las láminas de DBS y microscopía fueron llevados a la estación de campo al final de cada día para su posterior procesamiento. Se evaluó una novedosa herramienta molecular, la reacción de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP), dirigida contra el genoma del apicoplasto de Plasmodium falciparum, para la detección de individuos asintomáticos infectados con malaria.
La prevalencia de la malaria por P. falciparum fue del 37% (127/341) según la detección por LAMP, del 30% (104/341) por microscopía y del 37% (126/341) usando la prueba SD Bioline Malaria Pf Antígeno RDT (Standard Diagnostics, Inc .; Yongin, República de Corea).En comparación con el método de referencia de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la sensibilidad fue del 92% para LAMP, 78% para microscopía, y 76% para la PDR; la especificidad fue del 97% para LAMP, 99% para la microscopía, y de 88% para las PDR. El tiempo de respuesta para todo el ensayo LAMPfue de aproximadamente tres horas y 30 minutos para un promedio de 27 ± 9.5 muestras recogidas por día, en comparación con un mínimo de 10 muestras por hora por operador por RDT y más de ocho horas por microscopía.
Los autores llegaron a la conclusión de que con un tiempo de respuesta más corto y un procesamiento de alta eficiencia, los resultados de LAMP estarían disponibles mucho más rápido que por microscopía y más fiable que con la PDR, apoyando el uso de esta prueba de diagnóstico para la detección masiva y el tratamiento (MSAT) o para las campañas de detección enfocadas y el tratamiento (FSAT). El genoma del apicoplasto contra el que esteanálisis LAMP novedosoestá dirigido es único para el parásito, garantizando, de esta manera, una alta especificidad. El estudio fue publicado el 9 de octubre de 2015, en la revista Malaria Journal.
Enlaces relacionados:
Medical Research Council Unit
Standard Diagnostics
Los portadores asintomáticos, que representan el depósito humano que contribuye a la transmisión de los parásitos, generalmente tienen densidades de parásitos mucho menores, en comparación con los individuos sintomáticos, en los umbrales de detección de menos de 200 parásitos/μL, por debajo del cual las herramientas de diagnóstico estándar, tales como la microscopía y pruebas de diagnóstico rápido (PDR) se vuelven menos fiables.
Un equipo de colaborares científicos dirigido por los que están en la Unidad del Concejo de Investigación Médica (Banjul, Gambia) recolectaron la sangre de 341 individuos cuya edad media era de 9 años (rango de 1 a 68 años), y se hicieron exámenes para detectar la malaria. Con un solo pinchazo en el dedo, se recogieron muestras de sangre para la PDR, la gota gruesa (TBF) y muestras de sangre seca (DBS). Las PDR fueron leídas inmediatamente en el campo, mientras que las láminas de DBS y microscopía fueron llevados a la estación de campo al final de cada día para su posterior procesamiento. Se evaluó una novedosa herramienta molecular, la reacción de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP), dirigida contra el genoma del apicoplasto de Plasmodium falciparum, para la detección de individuos asintomáticos infectados con malaria.
La prevalencia de la malaria por P. falciparum fue del 37% (127/341) según la detección por LAMP, del 30% (104/341) por microscopía y del 37% (126/341) usando la prueba SD Bioline Malaria Pf Antígeno RDT (Standard Diagnostics, Inc .; Yongin, República de Corea).En comparación con el método de referencia de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la sensibilidad fue del 92% para LAMP, 78% para microscopía, y 76% para la PDR; la especificidad fue del 97% para LAMP, 99% para la microscopía, y de 88% para las PDR. El tiempo de respuesta para todo el ensayo LAMPfue de aproximadamente tres horas y 30 minutos para un promedio de 27 ± 9.5 muestras recogidas por día, en comparación con un mínimo de 10 muestras por hora por operador por RDT y más de ocho horas por microscopía.
Los autores llegaron a la conclusión de que con un tiempo de respuesta más corto y un procesamiento de alta eficiencia, los resultados de LAMP estarían disponibles mucho más rápido que por microscopía y más fiable que con la PDR, apoyando el uso de esta prueba de diagnóstico para la detección masiva y el tratamiento (MSAT) o para las campañas de detección enfocadas y el tratamiento (FSAT). El genoma del apicoplasto contra el que esteanálisis LAMP novedosoestá dirigido es único para el parásito, garantizando, de esta manera, una alta especificidad. El estudio fue publicado el 9 de octubre de 2015, en la revista Malaria Journal.
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