Hacen el fenotipo de los neutrófilos en el líquido sinovial en la artritis idiopática juvenil oligoarticular
Por el equipo editorial de LabMedica en español Actualizado el 26 Apr 2021 |
Imagen: El citómetro de flujo CytoFLEX tiene un amplio intervalo dinámico para resolver poblaciones tenues y brillantes en la misma muestra (Fotografía cortesía de Beckman Coulter).
La artritis idiopática juvenil (AIJ) es una enfermedad articular reumática inflamatoria, que afecta a los niños. A pesar de que la enfermedad comienza a una edad temprana, los síntomas pueden durar toda la vida e incluir daño articular irreversible o alteraciones del crecimiento.
El subtipo más común en el mundo occidental es el oligoarticular, comúnmente caracterizada por el inicio asimétrico de la enfermedad con inflamación en una a cuatro articulaciones grandes. Los neutrófilos son las células inmunes más prevalentes en el líquido sinovial en las articulaciones inflamadas de los niños con artritis idiopática juvenil oligoarticular.
Un equipo multidisciplinario de científicos médicos de la Universidad de Lund (Lund, Suecia), obtuvo neutrófilos de muestras apareadas de sangre y líquido sinovial de 17 pacientes con AIJ oligoarticular activa que se investigó fenotípicamente y 13 funcionalmente (fagocitosis y explosión oxidativa, mediante citometría de flujo). En un subconjunto de seis pacientes, también se obtuvieron muestras de sangre durante la enfermedad inactiva en una visita de seguimiento. La presencia de neutrófilos que expresan CD206 se investigó en biopsias sinoviales de cuatro pacientes mediante inmunofluorescencia.
Se investigaron los recuentos totales de glóbulos blancos y la frecuencia relativa de neutrófilos en las muestras de sangre y líquido sinovial en un instrumento XN-350 (Sysmex Corporation, Kobe, Japón). Las muestras de células sinoviales, orales y purificadas se lavaron con PBS después de la coloración. Las muestras se analizaron en un citómetro de flujo FACS Canto II (BD Biosciences, San José, CA, EUA) o en un CytoFLEX (Beckman Coulter, Brea, CA, EUA). La madurez de los neutrófilos se determinó utilizando marcadores de superficie. Otros métodos utilizados por los científicos incluyeron coloración por inmunofluorescencia de biopsias de tejido sinovial; estimulación de neutrófilos sanguíneos sanos con líquido sinovial de AIJ; investigar los neutrófilos de la cavidad bucal sana y evaluando la función efectora de neutrófilos.
El equipo informó que los neutrófilos en el líquido sinovial tenían un fenotipo activado, caracterizado por niveles aumentados de CD66b y CD11 y que la mayoría de los neutrófilos tenían un fenotipo CD16hi CD62Llow envejecido. Una gran proporción de los neutrófilos del líquido sinovial expresaban CD206, un receptor de manosa que no suele ser expresado por los neutrófilos, sino por los monocitos, macrófagos y células dendríticas. También se encontraron neutrófilos que expresan CD206 en biopsias de tejido sinovial. El fenotipo de los neutrófilos en el líquido sinovial no dependía únicamente de la transmigración. Funcionalmente, los neutrófilos del líquido sinovial tenían una capacidad fagocítica reducida y una tendencia hacia un estallido oxidativo deteriorado en comparación con los neutrófilos sanguíneos. Además, las funciones efectoras de los neutrófilos del líquido sinovial se correlacionaron negativamente con la proporción de neutrófilos CD206+.
Los autores concluyeron que los neutrófilos en la articulación inflamada en la AIJ oligoarticular estaban alterados, tanto en el fenotipo como en su función. Los neutrófilos en el líquido sinovial estaban activados, tenían un fenotipo envejecido, habían adquirido características similares a las de los monocitos y tenían una capacidad fagocítica alterada. El deterioro de la fagocitosis y el estallido oxidativo se asoció con el cambio de fenotipo. Especularon que estas alteraciones de los neutrófilos podrían desempeñar un papel en la inflamación articular sostenida que se observa en la AIJ. El estudio fue publicado el 9 de abril de 2021 en la revista Arthritis Research & Therapy.
Enlace relacionado:
Universidad de Lund
BD Biosciences
Beckman Coulter
El subtipo más común en el mundo occidental es el oligoarticular, comúnmente caracterizada por el inicio asimétrico de la enfermedad con inflamación en una a cuatro articulaciones grandes. Los neutrófilos son las células inmunes más prevalentes en el líquido sinovial en las articulaciones inflamadas de los niños con artritis idiopática juvenil oligoarticular.
Un equipo multidisciplinario de científicos médicos de la Universidad de Lund (Lund, Suecia), obtuvo neutrófilos de muestras apareadas de sangre y líquido sinovial de 17 pacientes con AIJ oligoarticular activa que se investigó fenotípicamente y 13 funcionalmente (fagocitosis y explosión oxidativa, mediante citometría de flujo). En un subconjunto de seis pacientes, también se obtuvieron muestras de sangre durante la enfermedad inactiva en una visita de seguimiento. La presencia de neutrófilos que expresan CD206 se investigó en biopsias sinoviales de cuatro pacientes mediante inmunofluorescencia.
Se investigaron los recuentos totales de glóbulos blancos y la frecuencia relativa de neutrófilos en las muestras de sangre y líquido sinovial en un instrumento XN-350 (Sysmex Corporation, Kobe, Japón). Las muestras de células sinoviales, orales y purificadas se lavaron con PBS después de la coloración. Las muestras se analizaron en un citómetro de flujo FACS Canto II (BD Biosciences, San José, CA, EUA) o en un CytoFLEX (Beckman Coulter, Brea, CA, EUA). La madurez de los neutrófilos se determinó utilizando marcadores de superficie. Otros métodos utilizados por los científicos incluyeron coloración por inmunofluorescencia de biopsias de tejido sinovial; estimulación de neutrófilos sanguíneos sanos con líquido sinovial de AIJ; investigar los neutrófilos de la cavidad bucal sana y evaluando la función efectora de neutrófilos.
El equipo informó que los neutrófilos en el líquido sinovial tenían un fenotipo activado, caracterizado por niveles aumentados de CD66b y CD11 y que la mayoría de los neutrófilos tenían un fenotipo CD16hi CD62Llow envejecido. Una gran proporción de los neutrófilos del líquido sinovial expresaban CD206, un receptor de manosa que no suele ser expresado por los neutrófilos, sino por los monocitos, macrófagos y células dendríticas. También se encontraron neutrófilos que expresan CD206 en biopsias de tejido sinovial. El fenotipo de los neutrófilos en el líquido sinovial no dependía únicamente de la transmigración. Funcionalmente, los neutrófilos del líquido sinovial tenían una capacidad fagocítica reducida y una tendencia hacia un estallido oxidativo deteriorado en comparación con los neutrófilos sanguíneos. Además, las funciones efectoras de los neutrófilos del líquido sinovial se correlacionaron negativamente con la proporción de neutrófilos CD206+.
Los autores concluyeron que los neutrófilos en la articulación inflamada en la AIJ oligoarticular estaban alterados, tanto en el fenotipo como en su función. Los neutrófilos en el líquido sinovial estaban activados, tenían un fenotipo envejecido, habían adquirido características similares a las de los monocitos y tenían una capacidad fagocítica alterada. El deterioro de la fagocitosis y el estallido oxidativo se asoció con el cambio de fenotipo. Especularon que estas alteraciones de los neutrófilos podrían desempeñar un papel en la inflamación articular sostenida que se observa en la AIJ. El estudio fue publicado el 9 de abril de 2021 en la revista Arthritis Research & Therapy.
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Universidad de Lund
BD Biosciences
Beckman Coulter
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