Validan prueba diagnóstica rápida en papel para la NS1 del dengue

La infección por el virus del dengue (DENV) es una de las enfermedades tropicales desatendidas más importantes del mundo y la enfermedad por mosquitos de más rápida propagación. Aproximadamente el 70% de los 3.900 millones de personas en riesgo viven en países de Asia Pacífico, principalmente en el sudeste asiático.

El diagnóstico temprano del dengue es esencial para la evaluación clínica, las investigaciones y el control de la enfermedad. Aunque los ensayos moleculares se utilizaron como el estándar de oro para diagnosticar la infección por dengue, estos métodos son costosos, tediosos y requieren la experiencia de los técnicos, lo que no es adecuado para las pruebas en los puntos de atención en áreas remotas.

Un equipo multidisciplinario de científicos que trabajaba con los de la Universidad de Tecnología de Rey Mongkut en Thonburi (Bangkok, Tailandia), analizó 250 muestras de suero sospechosas de dengue utilizadas en un estudio, que eran sueros archivados de pacientes sospechosos de dengue, recolectadas de forma rutinaria durante el pico de la epidemia de la enfermedad en Tailandia, de julio a septiembre de 2019. Las muestras de sangre de los pacientes se analizaron de forma rutinaria con un kit de prueba comercial NS1 del dengue (prueba Dengue Duo, SD BIOLINE, Abbott Park, IL, EUA), inmediatamente después de la recolección para diagnosticar y tratar a los pacientes.

El equipo desarrolló un kit de diagnóstico simple para las pruebas del dengue NS1, basado en un dispositivo analítico de papel microfluídico impreso en cera (μPAD), llamado DEN-NS1-PAD para la detección sensible y específica del NS1del dengue. El DEN-NS1-PAD permite la interacción específica entre los anticuerpos indicadores (rAb) marcados con nanopartículas de oro (AuNP) y la proteína NS1 del dengue. Los ARN virales en muestras de suero se extrajeron utilizando el Mini Kit de ARN Viral QIAamp (QIAGEN, Hilden, Alemania). Luego se sometieron a RT-PCR usando cebadores específicos del dengue, y los productos de RT-PCR se usaron como plantillas para la reacción de PCR anidada.

El equipo informó que de los 250 pacientes con sospecha de dengue que fueron admitidos en el hospital durante el período de estudio, se probaron dos PDR comercializadas; de los 250 pacientes, 219 fueron con la prueba SD BIOLINE Dengue Duo y la prueba de PCR. La prevalencia de la infección por dengue fue del 45,21% por SD-NS1, 47,49% por DEN-NS1-PAD y 45,21% por la PCR anidada. Los resultados de la PCR anidada fueron 99 dengue positivos y 120 negativos. El límite de detección de DEN-NS1-PAD fue de 0,78 ng/mL. Mostró 88,89% de sensibilidad, 86,67% de especificidad y una correlación de concordancia sustancial en comparación con la PCR anidada. Por el contrario, SD BIOLINE para la detección de NS1 (SD-NS1) mostró una sensibilidad del 87,88%, una especificidad del 90,00% y también tuvo una correlación de concordancia sustancial con la PCR anidada.

Los autores concluyeron que el desempeño del DEN-NS1-PAD está casi a la par con el SD-NS1 para la detección de la infección por dengue en casos febriles agudos. El dispositivo posee una mejor sensibilidad que SD-NS1, especialmente para el paciente diagnosticado después del día cinco de la enfermedad. El DEN-NS1-PAD puede ser una alternativa potencial a las PDR comerciales existentes en la detección de la infección aguda por dengue en el futuro. El estudio se publicó originalmente en la edición de junio de 2021 de la revista International Journal of Infectious Diseases.

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Universidad de Tecnología de Rey Mongkut en Thonburi
SD BIOLINE