Evalúan nuevas variantes de PCR para diagnóstico mundial de la leishmaniasis

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 03 Dec 2014

Un estudio de tres nuevas variantes de PCR, basadas en el gen de la Leishmania, hsp 70, evaluadas directamente en muestras clínicas, ha demostrado que las tres herramientas nuevas son aplicables para la tipificación de la Leishmania a nivel de especie en varios contextos geográficos, clínicos y de muestras.

En el diagnóstico de la leishmaniasis, la identificación de las especies de Leishmania causantes también es importante para el tratamiento y el pronóstico, así como para la epidemiología (incluyendo la documentación de especies simpátricas e importadas), la identificación de nuevos reservorios no humanos, y para establecer el enlace con los casos de fracasos del tratamiento. Se han desarrollado y validado directamente tres nuevas variantes de PCR basados en el gen hsp70 (proteína de choque térmico 70) recientemente (sin la necesidad de cultivo) en muestras clínicas del Nuevo Mundo, de Perú.

Imagen: Sensibilidad de la detección de la leishmaniasis – Porcentaje de positividad en las diferentes hsp70-PCRs (G, F, N, C), evaluadas en el total de 98 muestras clínicas de casos, preconfirmados, de leishmaniasis cutánea o visceral (Todas) y en diferentes subconjuntos (Médula ósea, Sangre/Capa de leucocitos), ganglios linfáticos, biopsia de piel) (Fotografía cortesía de Montalvo et al./Diagnostic Microbiology and Infectious Disease).

Ahora, un equipo internacional, dirigido por el Prof. Gert Van der Auwera del Instituto de Medicina Tropical (IMT) en Amberes (Bélgica), ha evaluado el desempeño de estas tres PCRs en un conjunto de 133 muestras clínicas pre-confirmadas positivas o negativas (42 cutáneas y 56 pacientes con leishmaniasis visceral y 35 casos negativos) - todos de países del Viejo Mundo: Italia, Sudán, Israel y Túnez. Las muestras fueron retrospectivas (habían sido recolectadas previamente) e incluyeron muestras de médula ósea, sangre, capa leucocitaria, aspirados de ganglios linfáticos y biopsias de la lesión.

Los resultados mostraron que las tres nuevas PCRs eran más sensibles que las descritas anteriormente para hsp70, y sus análisis del polimorfismo de la longitud del fragmento de restricción respectivo (RFLP), fueron más eficientes para la identificación de especies. Además, en el 79% de las muestras positivas confirmadas, las especies podían ser identificadas directamente a partir de la muestra de ADN original.

El estudio descrito por Montalvo AM et al. en el número de septiembre de 2014, de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease sugiere que estas pruebas de PCR tienen potencial para convertirse en un método de referencia mundial para la identificación de especies de Leishmania en muestras clínicas.

Enlace relacionado:
Institute of Tropical Medicine (ITM) at Antwerp