Prueba rápida para Chlamydia para laboratorios clínicos y puntos de atención

Un análisis rápido para Chlamydia trachomatis basado en una técnica de avanzada, de amplificación de ácidos nucleicos, detecta tan pocos como 5 a 12 patógenos por prueba en 20 minutos, directamente de las muestras de orina sin necesidad de purificación de ADN.

Imagen: Micrograma (500x) de una citología humana mostrando C. trachomatis en las vacuolas (Fotografía cortesía de Wikimedia Commons).

Chlamydia trachomatis es el patógeno humano de transmisión sexual más común. Las infecciones causadas por este microorganismo son un problema importante de salud pública debido a las posibles consecuencias graves a largo plazo, incluyendo un mayor riesgo de embarazo ectópico, dolor pélvico crónico e infertilidad. Sin embargo, aproximadamente dos tercios de las mujeres infectadas experimentan síntomas mínimos o no los experimentan, por lo que a menudo no son diagnosticadas.

Hasta la fecha, se han desarrollado varias pruebas para los puntos de atención que pueden detectar C. trachomatis. Aunque muchos de ellas son rápidas y específicas, demuestran una sensibilidad de sólo 10% a 40%, la cual es inadecuada para aplicaciones a gran escala.

Los investigadores de la Universidad de Estocolmo (Suecia) y sus colegas en la Universidad de Tartu (Estonia) desarrollaron una prueba mejorada para la detección de C. trachomatis mediante amplificación polimerasa recombinasa (RPA), una técnica de amplificación de ácidos nucleicos que se basa en la síntesis in vitro de muchas copias de ADN o ARN a partir de una plantilla original. El ensayo nuevo amplifica fragmentos de nucleótidos del gen de C. trachomatis CDS2 a partir de muestras de orina. El ensayo no requiere la purificación del ADN total de la muestra de orina. La calefacción durante cinco minutos a 90°C es suficiente para liberar lo suficiente del objetivo de amplificación para determinar si el agente patógeno está presente. Aunque la orina contiene inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se pueden analizar hasta cinco microlitros sin afectar a la sensibilidad de la prueba RPA.

Los investigadores utilizaron el ensayo RPA para analizar las muestras de orina de 70 pacientes (51 mujeres y 19 varones) de una clínica de salud sexual en Estonia. Las muestras fueron analizadas en paralelo con RPA y con el ensayo Cobas Amplicor de Roche (Basilea, Suiza) para C. trachomatis. Los resultados revelaron que 58 muestras fueron negativas con ambos análisis (100% de especificidad). Doce de las muestras dieron positivo utilizando el ensayo de Roche. De éstas, 10 dieron resultados positivos y dos dieron resultados negativos con la reacción RPA. Con base en estos resultados, la sensibilidad clínica del ensayo RPA se puede calcular en 83%.

“El alarmantemente mal desempeño de las pruebas POC disponibles para C. trachomatis ha limitado su uso más amplio, y hay una necesidad clara de plataformas de diagnóstico más sensibles y rentables. Por lo tanto, hay la necesidad de una prueba que se pueda realizar en el lugar y que ofrezca una detección razonablemente sensible”, dijo el autor principal, el Dr. Ülo Langel, profesor de biotecnología molecular en la Universidad de Tartu y profesor de neuroquímica en la Universidad de Estocolmo. “El análisis [ RPA ] permite una detección muy específica de C. trachomatis con niveles de sensibilidad mucho mejores en comparación con los ensayos de C. trachomatis POC, disponibles en la actualidad”.

El estudio fue publicado en la edición de enero 2014 de la revista Journal of Molecular Diagnostics.

Enlaces relacionados:

Stockholm University

University of Tartu

Roche