Análisis detecta hepatitis B en varios tipos de muestras

La infección por el virus de la hepatitis B (VHB) ha provocado más de 686,000 muertes por año en todo el mundo. Aproximadamente dos mil millones de personas en todo el mundo están infectadas con el VHB y están en riesgo de desarrollar cirrosis y carcinoma hepatocelular, que ocupa el quinto lugar en términos de mortalidad por tumores malignos.

Un nuevo ensayo de VHB ofrece ventajas sobre los métodos actualmente utilizados porque tiene la capacidad de detectar el ADN circular cerrado (cccADN) en suero, células individuales y muestras de tejido conservadas. Este ensayo se puede usar para diagnosticar el carcinoma hepatocelular (CHC) en una etapa más temprana para administrar el tratamiento de manera más efectiva.


Científicos de la Universidad de Wuhan (Wuhan, China) inscribieron a un total de 168 pacientes con infección por VHB (HBsAg/VHB-ADN positivo) en un estudio entre diciembre de 2013 y noviembre de 2015 en el Hospital Zhongnan. El estudio incluyó 79 casos de pacientes sin CHC, 56 sin y 23 pacientes con cirrosis; 50 hombres y 29 mujeres; edad media, 41,7 ± 12.8 años, y 89 casos de pacientes con CHC, 75 hombres y 14 mujeres; edad media, 53,4 ± 15,3 años. En total, se recolectaron 79 muestras de suero de pacientes que no tenían CHC, 68 muestras de suero preoperatorias el primer día después del ingreso en el hospital y 14 muestras emparejadas de tejidos tumorales incluidas en parafina (FFPE) y fijadas con formalina, así como 21 tejidos tumorales FFPE no apareados de pacientes con CHC.

El número de copias de ADN del VHB en suero se analizó con el kit COBAS TaqMan 48 (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza). El HBsAg serológico, el anticuerpo de la hepatitis B (HBsAb), HBeAg, el anticuerpo de la hepatitis Be (HBeAb), el anticuerpo de la hepatitis Bc (HBcAb) y el anti-HCV, fueron detectados por los inmunoensayos enzimáticos quimioluminiscentes (Abbott Architect i system; Abbott Diagnostics, Lake Bluff, IL, EUA). El número de copias de cccADN se cuantificó utilizando el sistema de PCR Digital QX200 Droplet (Bio-Rad, Hércules, CA, EUA). Los parámetros bioquímicos clínicos y los biomarcadores tumorales se midieron mediante un analizador químico automático.

El equipo descubrió que la prueba ddPCR era útil para identificar qué pacientes podrían albergar carcinoma hepatocelular y descubrió que casi el 90% de los 68 pacientes con CHC tenían positividad para el cccADN en comparación con el 53% de 79 pacientes sin CHC. Se encontró que el número de copias de cccADN en suero era más alto en los pacientes con CHC en comparación con los pacientes que no tenían CHC. El análisis combinado de cccADN en suero y del ADN de VHB permitió diferenciar a los pacientes con CHC de los pacientes que no tenían CHC. Los investigadores también pudieron confirmar que el cccADN en suero se correlacionó positivamente con los niveles de cccADN medidos en las muestras de hígado.

Song-Mei Liu, MD, PhD, la investigadora principal, dijo: “El desarrollo de CHC está fuertemente asociado con el VHB. Recientemente, se han establecido varias estrategias antivirales nuevas dirigidas al cccADN para mejorar el aclaramiento del VHB. Es de gran importancia clínica proporcionar un método exacto y sensible para la detección de cccADN. Con este método, cada vez más pacientes con infección crónica por el VHB tendrán un tratamiento de precisión disponible para prevenir o retrasar la aparición del CHC, y el CHC en pacientes podría diagnosticarse en una etapa más temprana”. El estudio fue publicado el 12 de abril de 2018 en la revista The Journal of Molecular Diagnostics.