Un nuevo estudio identifica el impacto del procesamiento de muestras en la sensibilidad de las pruebas rápidas de detección de antígenos para el SARS-CoV-2

Un nuevo estudio destinado a identificar el impacto del procesamiento de muestras en la sensibilidad de las pruebas rápidas de detección de antígenos (RAD) para el SARS-CoV-2 ha demostrado que es necesario seleccionar los métodos de inactivación adecuados y las soluciones de medios de transporte viral (VTM) durante el desarrollo del reactivo, evaluación del desempeño y aplicación clínica.

El estudio publicado por la Asociación Médica China (Beijing, China) exploró el efecto de diferentes métodos de inactivación, soluciones VTM y conservación de muestras sobre la sensibilidad de cuatro kits RAD basados ​​en dos cepas de SARS-CoV-2. Según los resultados, la inactivación por calor puede no ser un método de inactivación adecuado para las pruebas de SARS-CoV-2, especialmente para las pruebas clínicas y la evaluación del rendimiento. Este hallazgo fue consistente con un estudio anterior que informó que la inactivación por calor dañó la eficiencia del ensayo de RT-PCR para el SARS-CoV-2. La inactivación por calor podría ser uno de los posibles factores de resultados falsos negativos en el ensayo de RT-PCR para

detección de SARS-CoV-2. La inactivación por calor destruye la estructura del ARN y la proteína del SARS-CoV-2. El ensayo de RT-PCR puede detectar el nucleótido del SARS-CoV-2, mientras que la prueba RAD puede detectar el antígeno del SARS-CoV-2. Por lo tanto, la inactivación por calor podría afectar sustancialmente la sensibilidad de los kits RAD.

Los inactivadores químicos pueden contribuir mucho a proteger al personal de laboratorio encargado de detectar el SARS-CoV-2, especialmente la detección del ácido nucleico porque la inactivación química puede inactivar las muestras clínicas que contienen el SARS-CoV-2. De manera similar, es posible que existan algunos productos químicos en los VTM que puedan desnaturalizar e inactivar proteínas, lo que afectaría el rendimiento de los kits RAD. El impacto de la solución VTM en los kits RAD puede ser conferido principalmente por los anticuerpos de detección utilizados en los kits, que utilizan diferentes epítopos para reconocer los antígenos en otros kits. Durante la inactivación de la muestra, la solución VTM puede cambiar la estructura terciaria del antígeno en la muestra y hacer que se degrade. Por tanto, el reconocimiento entre el antígeno y los anticuerpos de detección en el siguiente proceso de detección podría variar mucho. Por lo tanto, la reacción de diferentes reactivos al mismo VTM fue diferente, lo que indica que es necesario elegir las soluciones de VTM adecuadas para las pruebas RAD.

Además, los resultados mostraron que, junto con la extensión del tiempo de conservación y el aumento de los ciclos de congelación-descongelación, el valor de detección de los kits RAD disminuyó ligeramente, pero la mayoría de ellos todavía estaban en el rango de detección. Un estudio anterior había demostrado que el número de copias del ADN objetivo disminuyó después de 10 ciclos de congelación-descongelación, lo que afectó el rendimiento de la PCR digital en gotas. Además, no hubo acceso a las pruebas de carga viral del VIH cuando la sangre completa se almacenó en tubos con EDTA o tubos de preparación de plasma durante más de 6 h 25°C. Por lo tanto, una temperatura de almacenamiento y un tiempo de conservación razonables de las muestras son medidas esenciales para garantizar la precisión de los resultados de las pruebas.

Por lo tanto, el estudio reveló que diferentes métodos de inactivación de virus y soluciones VTM tienen un impacto significativo en la sensibilidad de los kits RAD. Por lo tanto, es necesario seleccionar los métodos de inactivación y las soluciones VTM adecuados. Además, como la mayoría de los kits RAD permanecen estables en diferentes condiciones de almacenamiento, no es necesario considerar las condiciones de conservación de las muestras. Según los resultados, durante el desarrollo del reactivo, la evaluación del rendimiento y la aplicación clínica, las muestras no deben tratarse con inactivación por calor o soluciones VTM no calificadas antes de evaluar el rendimiento de las muestras clínicas, como la limitación de detección más baja. Además, las muestras no deben tratarse con inactivación por calor o soluciones de VTM no calificadas en ensayos clínicos. Además, también se debe prestar atención a las advertencias de los reactivos aprobados, como la recolección y conservación de muestras. En resumen, seleccionar soluciones VTM podría ser más conveniente, ya que pueden descifrar e inactivar virus de manera efectiva sin afectar las pruebas de antígenos.

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Asociación Médica China