Dispositivo de recolección de sangre minimiza liberación del ADN celular

El ADN libre de células (cfADN) que circula en la sangre, se usa actualmente para las pruebas diagnósticas y pronósticas no invasivas, por lo que minimizar el ADN de fondo es vital para la detección de cfADN de baja abundancia.

Un dispositivo de recolección de sangre de reciente introducción podría reducir los niveles de base del ADN genómico (gADN) en el plasma, en comparación con los tubos estándar, cuando es sometido a condiciones que pueden ocurrir durante el almacenamiento y envío de muestras.


Los científicos que trabajan para un fabricante comercial tomaron muestras de sangre de donantes sanos en tubos con ácido etilendiaminotetraacético tri-potásico (K3EDTA) y en tubos DNA BCT Libres de Células (BCT), que es un dispositivo nuevo de recolección que contiene un nuevo cóctel químico. Las muestras se agitaron o se dejaron incólumes para simular el envío. En un estudio del envío, las muestras fueron enviadas o no enviadas. Para evaluar las variaciones de temperatura, las muestras fueron incubadas a 6°C, 22°C, y 37°C. En todos los casos, el plasma fue recogido por centrifugación y el ADN total en plasma (pADN) fue analizado mediante reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR). El Kit de Ácidos Nucleicos Circulantes, QIAamp, (Qiagen, Santa Clarita, CA, EUA) fue utilizado para la extracción de pADN.

Los tubos BCT son fabricados por Streck, Inc., (Omaha, NE, EUA), mientras que los tubos con K3EDTA fueron los BD Vacutainer (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, EUA). Sacudir la sangre extraída en los tubos de K3EDTA mostró un aumento significativo en el pADN a las 24 horas, mientras que no se observaron cambios en los tubos Libres de Células. La sangre incubada a 6°C, 22°C, y 37°C mostró aumentos significativos en el pADN aislado de tubos K3EDTA, mientras que los niveles de pena en los tubos DNA BCT Libre de Células se mantuvieron estables durante 14 días.

El novedoso cóctel químico estabilizante previene la liberación de gADN al plasma, después de la flebotomía, hasta por 14 días, evitando los requisitos engorrosos. Usando este dispositivo de recolección de sangre, el almacenamiento a temperatura ambiente, ex vivo, se vuelve posible, permitiendo flexibilidad para la toma de sangre, en sitios remotos y el envío a los laboratorios centralizados para un análisis posterior del cfADN sin centrifugaciones preliminares o criopreservación.

Los autores concluyeron que los tubos DNA BCT Libres de Células previenen los aumentos en los niveles de gADN, de fondo, causado por fluctuaciones en la temperatura o agitación que pueden ocurrir durante el almacenamiento, envío y procesamiento, de muestras de sangre. Este tubo novedoso, de recolección de muestras, suministra un método para obtener muestras estabilizadas, de alta calidad, para la detección de ADN raro y determinar las concentraciones exactas de cfADN. El estudio fue publicado en la edición del 12 de julio de 2013, de la revista Journal of Clinical Laboratory Analysis.

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Qiagen

Streck, Inc.

Becton Dickinson