Condiciones preanalíticas influyen en estabilidad de microARN libres de células en muestras de plasma sanguíneo

Científicos de todo el mundo trabajan para mejorar la calidad del diagnóstico y el pronóstico de diversas enfermedades, incluido el cáncer, mediante el análisis de diferentes fluidos corporales como la sangre, la orina y la saliva. Los microARN, con una longitud de entre 18 y 25 nucleótidos, son reguladores postranscripcionales bien establecidos de la expresión génica y desempeñan un papel crucial en la comunicación intracelular. Estas moléculas, presentes en fluidos biológicos humanos, se liberan tanto de células normales como tumorales, con cerca de 3.000 microARN identificados. Estos microARN circulan en fluidos biológicos, a menudo unidos a biopolímeros o empaquetados en microvesículas, lo que los hace relativamente estables. Por ello, se consideran una fuente ideal de material diagnóstico para biopsias líquidas destinadas a detectar tumores u otras patologías. Para que los microARN se utilicen eficazmente como biomarcadores, es necesario desarrollar directrices sistemáticas y universalmente aceptadas para el procesamiento de biomuestras, en particular en lo que respecta a su estabilidad durante el almacenamiento. Ahora, una nueva investigación ha demostrado que los factores preanalíticos, como las condiciones de almacenamiento del plasma sanguíneo o de las vesículas extracelulares, afectan significativamente la estabilidad de los microARN, influyendo así en las concentraciones detectadas de microARN específicos.

En un estudio realizado por investigadores del Instituto de Biología Química y Medicina Fundamental de Novosibirsk (ICBFM, Novosibirsk, Rusia), el equipo investigó cómo las diferentes condiciones de almacenamiento de plasma afectaban la estabilidad de los microARN endógenos en el plasma sanguíneo humano. El estudio se centró en cuatro microARN endógenos (miR-16, miR-19b, miR-23a, miR-451a) y el microARN exógeno cel-miR-39, evaluando su estabilidad en incubación a corto y largo plazo a diversas temperaturas. Además, el equipo examinó cómo el almacenamiento a largo plazo afectaba la estabilidad de los microARN dentro de las vesículas extracelulares (VE). También compararon los rendimientos de microARN de muestras de plasma frescas y archivadas, y evaluaron el impacto de las variaciones en los protocolos de extracción de miARN y el uso de agentes estabilizadores de ARN en la eficiencia del aislamiento.

Los investigadores emplearon un método de aislamiento de miARN monofásico, el cual ya habían utilizado con éxito en estudios previos para identificar biomarcadores de miARN para el cáncer de pulmón en sangre. Publicado en la revista ExRNA, el estudio confirmó que la velocidad de degradación de los microARN se ve influenciada por su estructura y empaquetamiento. También descubrieron que la adición de diversas soluciones de estabilización a los biofluidos puede afectar la eficiencia de la extracción de miARN. Los hallazgos a largo plazo de este estudio enfatizan la importancia de analizar los ácidos nucleicos libres de células, incluyendo los microARN, dentro de las 2 a 4 semanas posteriores a la recolección de muestras biológicas para garantizar la precisión y fiabilidad de los resultados diagnósticos.