Validan un diagnóstico prenatal no invasivo de la atrofia muscular espinal

El descubrimiento del ADN libre de células (cfADN) en el plasma materno, mejoró el desarrollo de pruebas prenatales no invasivas (NIPT). Aunque ya se han aplicado clínicamente las NIPT para las aneuploidías fetales, el diagnóstico prenatal no invasivo para muchos de los trastornos de un solo gen permanece en la etapa de desarrollo.

La PCR digital de gotitas es una tecnología con alta sensibilidad, especificidad y exactitud para detectar y analizar ácidos nucleicos de baja abundancia. Su alta resolución está garantizada por millones de gotas de aceite generadas por prueba. Mediante la utilización de la PCR digital, se ha demostrado en varios estudios la viabilidad del diagnóstico prenatal no invasivo (NIPD) para los trastornos monogénicos fetales que analizan el cfADN.


Los genetistas médicos de la Universidad Central del Sur (Changsha, China) reclutaron a mujeres embarazadas que buscaban un diagnóstico prenatal de atrofia muscular espinal (AME) en el período de 16 a 22 semanas de gestación para un estudio. A todos los embarazos les habían realizado un cribado prenatal no invasivo de aneuploidías fetales mediante secuenciación de próxima generación (NGS).

Los científicos extrajeron ADN libre de células del plasma materno utilizando el kit de ácido nucleico circulante QIAamp (Qiagen, Hilden, Alemania) y las concentraciones de muestras de cfADN se analizaron en el instrumento Qubit (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA). Al líquido amniótico, obtenido por amniocentesis, se le extrajo el ADN genómico fetal por el método de fenol-cloroformo. La PCR digital por gotitas RainDrop (RainDance Technologies, Billerica, MA, EUA) se realizó siguiendo los protocolos estándar. Los números de copia SMN1/SMN2 de todos los participantes y fetos se cuantificaron mediante el análisis multiplex de amplificación de sonda dependiente de la ligadura (MLPA) usando el kit SALSA MLPA (MRC Holland, Ámsterdam, Países Bajos).

El equipo informó que la tasa de concordancia, con los resultados de las pruebas MLPA, del ADN de amniocitos fue del 94,12% en un conjunto de pruebas y del 90% en otro conjunto de participantes. Para todas las pruebas con un resultado clasificable, el porcentaje de concordancia con los resultados de las pruebas MLPA de ADN de amniocitos fue de hasta el 100% (25/25). Los autores concluyeron que lograron desarrollar una técnica directa, rápida y de bajo costo, que tiene el potencial de ser utilizada para el diagnóstico prenatal no invasivo del primer trimestre y la detección de atrofia muscular espinal con considerable confiabilidad y factibilidad. El estudio se publicó el 25 de septiembre de 2019 en la revista Journal of Clinical Laboratory Analysis.

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