Novedoso análisis discrimina a varias especies de Aspergillus

La aspergilosis invasiva (AI) es causada principalmente por Aspergillus fumigatus y cuando el diagnóstico se hace temprano y la terapia, de primera línea con voriconazol se inicia rápidamente, se observa una mortalidad relativamente baja.

Sin embargo, en la última década, ha surgido una resistencia a los azoles en todo el mundo la cual representa una amenaza ya que la AI con A. fumigatus, resistente a los azoles, se asocia con una alta mortalidad del 88%. Puesto que las pruebas de susceptibilidad a los fármacos in vitro, a menudo no son factibles, ya que los cultivos permanecen negativos o las especies hermanas no esporulan, las técnicas moleculares son una opción viable para reemplazarlas.


Científicos del Centro Médico Universitario Erasmus (Rotterdam, Holanda), utilizaron un ensayo multiplex, en tiempo real, de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), con el fin de detectar especies de Aspergillus y las posibles mutaciones en el gen Cyp51A de A. fumigatus. Los investigadores realizaron el ensayo en cepas hermanas cultivadas, obtenidas de dos casos clínicos. Además de evaluar la precisión del ensayo, se ensayó un mayor conjunto de cepas: se obtuvieron seis cepas de A. lentulus y 12 cepas del complejo A. felis (cinco A. felis, cuatro A. parafelis y tres A. pseudofelis) además de las tres cepas de control de A. fumigatus (una WT, una mutante TR34/L98H y una mutante TR46/T289A/Y121F).

El ensayo de PCR, en tiempo real, múltiplex, AsperGenius (PathoNostics, Maastricht, Holanda, www.pathonostics.eu), fue realizado en cepas obtenidas de biopsia pulmonar y en un caso de biopsia pleural en el segundo caso. Ambas cepas dieron señales positivas para la especie Aspergillus y la sección Aspergillus Fumigati. La PCR de resistencia, AsperGenius, no detectó el objetivo TR34 en A. lentulus y en A. felis, en contraste con lo encontrado en A. fumigatus. Los picos de fusión para los marcadores, L98H y Y121F, difirieron y los del marcador Y121F fueron particularmente adecuados para discriminar entre las tres especies. Los autores concluyeron que el ensayo puede utilizarse para discriminar rápidamente, A. fumigatus, A. lentulus y A. felis. El estudio fue publicado en la edición de marzo de 2017 de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease.